巨噬細(xì)胞清除劑--氯膦酸鹽脂質(zhì)體(Clodronate Liposomes)的實(shí)驗(yàn)方法

脂質(zhì)體是用于遞送治療劑和診斷劑的*廣泛使用的納米載體平臺，已被批準(zhǔn)用于臨床實(shí)踐。氯膦酸鹽（也稱為二氯亞甲基二膦酸鹽）可被細(xì)胞代謝以阻斷線粒體呼吸，因?yàn)樾纬闪瞬豢伤獾?ATP 類似物，然后導(dǎo)致細(xì)胞死亡（細(xì)胞凋亡）。氯膦酸鹽通過包埋在脂質(zhì)體中的形式注射后，巨噬細(xì)胞吞噬氯膦酸鹽脂質(zhì)體并消化脂質(zhì)體膜。氯膦酸鹽不被消化，會保留在巨噬細(xì)胞內(nèi)。隨著更多的氯膦酸鹽攝入和消化更多的氯膦酸鹽脂質(zhì)體，更多的氯膦酸脂質(zhì)體會在巨噬細(xì)胞內(nèi)積聚。在一定的細(xì)胞內(nèi)濃度下，氯膦酸鹽將通過啟動程序性細(xì)胞死亡（即凋亡）來清除巨噬細(xì)胞。由于所氯膦酸鹽和脂質(zhì)體磷脂對其他非吞噬細(xì)胞都沒有毒性，因此這種方法允許特異性消耗已經(jīng)存在的吞噬巨噬細(xì)胞。

西安瑞禧生物公司提供的巨噬細(xì)胞清除劑--氯膦酸鹽脂質(zhì)體(Clodronate Liposomes)可有效清除動物體內(nèi)不同組織部位和血液中的巨噬細(xì)胞。

不同組織巨噬細(xì)胞清除的實(shí)驗(yàn)方法

氯膦酸鹽脂質(zhì)體處理人血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）和巨噬細(xì)胞（J774A.1）（A）24 h（B）48h后細(xì)胞活力測定

氯磷酸鹽脂質(zhì)體被巨噬細(xì)胞吞噬后，在溶酶體的作用下釋放出氯磷酸鹽，氯磷酸鹽累積到一定量會對細(xì)胞產(chǎn)生不可逆性損傷，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞凋亡。從圖中可以看出，巨噬細(xì)胞J774A.1清除一半時(shí)的有效藥物濃度對正常細(xì)胞HUVEC幾乎沒有損傷。兩種細(xì)胞對藥物的敏感程度相差在10個(gè)數(shù)量級。